Détection des toxines

Détection moléculaire des toxines et d'autres facteurs de virulence associés à Vibrio cholerae

Isolat (culture pure) provenant d’urine, de selles, de sang, de l’environnement, d’aliments ou d’autres sources.

Isolat fourni sur un milieu de culture solide pour Vibrio cholerae (tube incliné/piqûre).

Envoyer sous forme de culture sur un milieu de culture solide ou dans un milieu de transport solide approprié. Le récipient de culture doit être étanche ou scellé de manière appropriée.

L’expédition des prélèvements doit être confiée à une personne détenant un certificat de formation TMD, conformément au Règlement sur le TMD. Pour plus d’information sur la catégorisation des matières à des fins d’expédition, veuillez consulter la partie 2 de l’appendice 3 du règlement ou la section 3.6.2 du règlement de l’IATA sur les produits dangereux.

Gastro-entérite, septicémie, infection ou autres.

Formulaire de requête des maladies entériques dûment rempli.

S/O

Les tests sont effectués, en totalité ou en partie, au moyen d’une épreuve mise au point en laboratoire qui n’a pas été entièrement validée ni vérifiée, car il n’y a pas de panel bien caractérisé

Identification par PCR développée en interne des gènes codant pour :
Toxine :
• ctx (toxine cholérique) : provoque une diarrhée sévère ; indicative de Vibrio spp. toxigènes.

• vhlyA (cytolysine) : La cytolysine de Vibrio cholerae (CVC) également appelée « hémolysine El Tor » est une exotoxine formant des pores qui contribue à la mort des cellules hôtes, en particulier des érythrocytes (globules rouges). La CVC est largement considérée comme renforçant la virulence de V. cholerae en tant que toxine accessoire, avec une capacité potentielle à induire une aggravation des symptômes diarrhéiques chez les hôtes infectés par des souches ctx-négatives

• rtx (toxine répétitive/accessoire) : associée au transport des toxines

Des méthodologies basées sur le séquençage du génome complet peuvent être appliquées pour faciliter la confirmation des gènes de toxines ou de virulence (non accrédité selon la norme ISO/IEC 17025 à l'heure actuelle).

Délai d’exécution : 7 jours calendaires. Remarque : les délais d'exécution pour les isolats de routine peuvent être prolongés en cas d'épidémies alimentaires majeures ou en raison d'une disponibilité limitée des ressources

1. Chow KH, Ng TK, Yuen KY, Yam WC. Detection of RTX toxin gene in Vibrio cholerae by PCR. J Clin Microbiol. 2001 Jul;39(7):2594-7. doi: 10.1128/JCM.39.7.2594-2597.2001. PMID: 11427575; PMCID: PMC88191.
2. Debellis L, Diana A, Arcidiacono D, Fiorotto R, Portincasa P, Altomare DF, Spirlì C, de Bernard M. 2009. The Vibrio cholerae cytolysin promotes chloride secretion from intact human intestinal mucosa. PLoS One 4:e5074.
3. Fields, P.I. et al. 1992. Use of Polymerase Chain Reaction for the Detection of Toxigenic Vibrio cholerae O1 strains from Latin American Cholera Epidemic. J. Clin. Microbiol. Aug: 2118-2121.
4. Saka HA, Bidinost C, Sola C, Carranza P, Collino C, Ortiz S, Echenique JR, Bocco JL. Vibrio cholerae cytolysin is essential for high enterotoxicity and apoptosis induction produced by a cholera toxin gene-negative V. cholerae non-O1, non-O139 strain. Microb Pathog. 2008 Feb;44(2):118-28. doi: 10.1016/j.micpath.2007.08.013. Epub 2007 Aug 31. PMID: 17919878.
5. Sathyamoorthy V, Huntley JS, Hall AC, Hall RH. Biochemical and physiological characteristics of HlyA, a pore-forming cytolysin of Vibrio cholerae serogroup O1. Toxicon. 1997 Apr;35(4):515-27. doi: 10.1016/s0041-0101(96)00163-8. PMID: 9133706.